果糖-1,6-二磷酸酶测试盒使用说明

果糖-1,6-二磷酸酶测试盒使用说明

测定意义：果糖-1,6 二磷酸酶又称果糖1,6 二磷酸酯酶，催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和无机磷，在糖的异生代谢和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。

测定原理：FBP 催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和无机磷，在反应体系中添加的磷酸葡萄糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm下测定NADPH增加速率，即可计算FBP 活性。

需自备的仪器和用品：分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

样本处理
1、组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 提取液）进行冰 浴匀浆。于 4℃，8000g，离心 10min，取上清，置冰上待测。

2、细胞：按照细胞数量（10 4 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min），于 4℃，8000g，离心 10min， 取上清，置冰上待测。