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人胰岛素原 (PI)ELISA kit使用说明书

更新时间:2023-12-21 浏览次数:1830

人胰岛素原 (PI)ELISA使用说明书

胰岛素原(PI)是胰岛素的前体激素它是由由胰岛β细胞合成和分泌主要在肾脏分解代谢。生理情况下,只有极少量的胰岛素原释放入血,在病理情况下,胰岛β细胞释放胰岛素原增多,血中胰岛素原水平升高。它是细胞在裂解成成熟胰岛素之前分泌的最后一个单链蛋白结构。它是由芝加哥大学的DonaldF.Steiner教授在1967年发现的。


本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA。往预先包被有人胰岛素原(PI)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体HRP酶结合物中间经过温育和洗涤,用底TMB显色TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素原(PI)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定

吸光度(OD计算样品浓度。

灵敏度:4.79pg/mL

检测范围12.5-800pg/mL

特异性:可检测样本中人的PI,且与其类似物无明显交叉反应。

image.png

浓度(pg/mL)

800

400

200

100

50

25

12.5

0

OD

2.32

1.93

1.31

0.85

0.51

0.39

0.28

0.1

校正OD

2.22

1.83

1.21

0.75

0.41

0.29

0.18

-


试剂盒性能:

1.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%

2.回收率:在选取的健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同

浓度水平的人PI,计算回收率。

样本类型

范围(%

平均回收率(%

血清(n=8)

84-101

96

血浆(n=8)

92-105

102

细胞培养上清(n=8)

96-108

105

3.线性稀释:分别在选取的4份健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入

高浓度人PI,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。

稀释比例

回收率(%

血清

血浆

细胞培养上清

12

范围

84-95

88-97

90-110

平均回收率

91

93

96

14

范围

89-103

87-108

105-115

平均回收率

94

98

109



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