更新时间:2023-12-21
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人胰岛素原 (PI)ELISA使用说明书
胰岛素原(PI)是胰岛素的前体激素,它是由由胰岛β细胞合成和分泌,主要在肾脏分解代谢。生理情况下,只有极少量的胰岛素原释放入血,在病理情况下,胰岛β细胞释放胰岛素原增多,血中胰岛素原水平升高。它是细胞在裂解成成熟胰岛素之前分泌的最后一个单链蛋白结构。它是由芝加哥大学的DonaldF.Steiner教授在1967年发现的。
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人胰岛素原(PI)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素原(PI)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定
吸光度(OD值),计算样品浓度。
灵敏度:4.79pg/mL
检测范围:12.5-800pg/mL
特异性:可检测样本中人的PI,且与其类似物无明显交叉反应。

浓度(pg/mL) |
800 |
400 |
200 |
100 |
50 |
25 |
12.5 |
0 |
OD值 |
2.32 |
1.93 |
1.31 |
0.85 |
0.51 |
0.39 |
0.28 |
0.1 |
校正OD值 |
2.22 |
1.83 |
1.21 |
0.75 |
0.41 |
0.29 |
0.18 |
- |
试剂盒性能:
1.重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%。
2.回收率:在选取的健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同
浓度水平的人PI,计算回收率。
样本类型 |
范围(%) |
平均回收率(%) |
血清(n=8) |
84-101 |
96 |
血浆(n=8) |
92-105 |
102 |
细胞培养上清(n=8) |
96-108 |
105 |
3.线性稀释:分别在选取的4份健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入
高浓度人PI,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 |
回收率(%) |
血清 |
血浆 |
细胞培养上清 |
1:2 |
范围 |
84-95 |
88-97 |
90-110 |
平均回收率 |
91 |
93 |
96 |
|
1:4 |
范围 |
89-103 |
87-108 |
105-115 |
平均回收率 |
94 |
98 |
109 |